F1ANNEX DAFRICAN HORSE SICKNESS
DIAGNOSIS
F12.INDIRECT ELISA FOR THE DETECTION OF ANTIBODIES TO AFRICAN HORSE SICKNESS VIRUS (AHSV) (PRESCRIBED TEST)
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F12.1.Test procedure
F12.1.1.Solid phase
F12.1.1.1.
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F12.1.1.2.
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F12.1.1.3.
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F12.1.1.4.
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F12.1.2.Test samples
F12.1.2.1.Serum samples to be tested, and positive and negative control sera, are diluted 1 in 25 in PBS + 5 % (w/v) skimmed milk + 0,05 % (v/v) Tween 20, 100 μl per well. Incubate for 1 hour at 37 °C.
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F12.1.2.2.
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F12.1.3.Conjugate
F12.1.3.1.
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F12.1.3.2.
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F12.1.4.Cromogen/Substrate
F12.1.4.1.Add 200 μl/well of chromogen/substrate solution (10 ml of 80,6 mM DMAB (dimethyl aminobenzaldehyde) + 10 ml of 1,56 mM MBTH (3-methyl-2-benzo-thiazoline hydrazone hydrochlorid) + 5 μl H2O2)
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F12.1.4.2.
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F12.2.Interpretation of the results
F12.2.1.
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F12.2.2.
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F12.2.3.
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F12.2.4.
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Repealed by Council Directive 2009/156/EC of 30 November 2009 on animal health conditions governing the movement and importation from third countries of equidae (codified version) (Text with EEA relevance).